双抗体夹心法是一种常用的免疫学检测方法,用于检测大分子抗原,如蛋白质、多肽等。其基本原理是利用两种特异性不同的抗体,将待检样品中的目标抗原夹在它们之间,形成“夹心”复合物,然后通过检测标记在其中一种抗体上的信号来确定目标抗原的存在与否。
具体来说,双抗体夹心法包括以下步骤:
1. 在固相载体(如微孔板)上涂覆第一种抗体,使其与载体表面结合。
2. 加入待检样品,使其中的目标抗原与第一种抗体结合。
3. 加入第二种抗体,使其与目标抗原结合,形成夹心复合物。
4. 洗去未结合的物质,以减少假阳性结果。
5. 加入检测标记(如酶、荧光素等)标记的第三种抗体,使其与第二种抗体结合。
6. 洗去未结合的物质,以减少假阳性结果。
7. 加入底物,观察或测定标记的信号强度,判断目标抗原是否存在。
双抗体夹心法可以用于检测食品中的多种危害物,例如:
1. 食品中的过敏原,如花生、虾等。
2. 食品中的毒素,如霉菌毒素、海洋毒素等。
3. 食品中的病原微生物,如大肠杆菌、沙门氏菌等。
4. 食