实验目的:
1. 了解蛋白质的盐析和透析原理及方法。
2. 掌握蛋白质的盐析和透析实验操作技能。
3. 学习如何评价蛋白质的纯度和活性。
实验原理:
蛋白质的盐析是利用不同离子浓度对蛋白质溶液中的蛋白质进行分离的一种方法。当蛋白质溶液中加入一定量的盐,离子浓度增加,会使得蛋白质变性并沉淀。而不同的盐对蛋白质的影响不同,因此可以通过改变盐的种类和浓度来实现对蛋白质的分离。
蛋白质的透析是利用半透膜对蛋白质进行分离的一种方法。半透膜可以让小分子物质通过,而阻止大分子物质通过。将蛋白质溶液置于半透膜袋内,然后将其悬浮在缓冲液中,蛋白质分子会从高浓度向低浓度扩散,逐渐从半透膜袋内扩散到缓冲液中,从而实现对蛋白质的分离。
实验步骤:
1. 盐析实验
(1)准备蛋白质溶液,并测定其初始吸光度。
(2)将不同种类和浓度的盐加入蛋白质溶液中,搅